1/ introduction inductive : du cas à la généralisation
L'analyse
de contenu qualitative
peut être réalisée de manière inductive
ou déductive.
L'analyse inductive
signifie que les thèmes et les catégories sont déduits des données
elles-mêmes, tandis que dans l'analyse
déductive, les thèmes et les
catégories sont définis à l'avance.
https://www.gospeech.com/fr/blog/methodes-de-recherche-qualitatives
19 juin 2024
1,1/
étude d'un cas pour faire école
À partir d'un article de presse :
https://www.ouest-france.fr/economie/consommation/alerte-a-la-listeria-des-produits-de-la-marque-vegan-jay-joy-retires-de-la-vente-8a986866-98c7-11ed-838e-db5cb73079c3
Vérification des données :
https://www.pasteur.fr/fr/file/3252/download?token=nuSFUB9S#page=1&zoom=auto,-158,842
Recherches complémentaires
"Listeria is the causative agent of the human
disease listeriosis. Listeriosis is contracted through contaminated
food. Pregnant women are especially vulnerable, when bacteria may
cross the placenta to infect the baby, who has no immunity. A mother
may only experience mild influenza-like symptoms yet may lose her
baby. Others that are also vulnerable include the elderly, persons
with cancer (especially of the bowel) and those on immunosuppressive
drugs. Listeria is also one of the causes of bacterial meningitis.
Gram positive, regular, non-sporing, rod prokaryote. Zoonotic
microorganism, domestic mammals, rodents and birds contaminate water,
vegetables and cheese, which, if ingested by humans, can cause
listeriosis, meningitis, septicaemia, encephalitis, food poisoning
and risk of spontaneous abortion in pregnant women, an aerobic motile
bacteria which is carried by domestic and wild animals. It is
transmitted to humans by eating infected animal products."
Science Photo Library
Histoire
1918 premier cas humain décrit par Dumon et
Cotoni chez un soldat atteint de méningite
1926 Canada, Murray, Webb et Swann décrivent 6
cas de mononucléose infectieuse chez le lapin et le cobaye et en
rendent responsable un germe qu’ils nomment Bacterium
monocytogenes
1927 Afrique du Sud, Harvey Pirie isole le même
germe que Murray chez la gerbille, atteinte de la maladie de la
rivière Triger, il le nomme Listerella hepatolytica en
l’honneur de Sir John Lister, chirurgien anglais émule de Louis
Pasteur, à l'occasion du 100e anniversaire de la
naissance de Lister
1929 démonstration de la pathogénicité humaine
1940 nom de Listeria monocytogenes proposé
à la nomenclature
1979 première éclosion documentée de listériose
d'origine alimentaire chez 23 patients dans un hôpital de Boston
1981 cause alimentaire / épidémie Canada
1998 déclaration obligatoire France
Classification
Domaine : Bacteria
Embranchement : Firmicutes
Classe : Bacilli
Ordre : Bacillales
Famille : Listeriaceae
genre : Listeria (Le genre Listeria comporte 21
espèces répertoriées. L. monocytogenes, L. innocua, L.
ivanovii subsp. ivanovii et subsp. londoniensis, L. seeligeri, L.
welshimeri, L. grayi biovar grayi et biovar murrayi, ainsi que L.
marthii, L. rocourtiae, L fleischmannii subsp. fleischmannii et
subsp. coloradensis, et L. weihenstephanensis, plus récemment
décrites. Deux espèces sont pathogènes. L. ivanovii,
pathogène pour les animaux et rarement pour l’humain, L.
monocytogenes, pathogène pour les deux.)
espèce : monocytogenes (considérée à tort dans
les années 1920 comme responsable de mononucléose infectieuse)
13 sérovars (ou serovar, également appelé
sérotype ou serotype) désigne une propriété
antigénique permettant d'identifier une cellule ou un virus par des
méthodes sérologiques, sur la base des caractéristiques de leur
antigène ou protéines. La technique est souvent appelée le
sérogroupage ou sérotypage ou ‘whole genome sequencing’ (WGS.)
En microbiologie, ce terme désigne, au sein d'une
espèce, une population ou une souche présentant des propriétés
antigéniques particulières.
Les noms des sérovars
bactériens s'écrivent, à la suite du nom latin du germe, en
caractères romains avec une initiale majuscule ( ex. dans un texte
en romain : Salmonelle enterica sérovar Typhi).
https://www.academie-medecine.fr/le-dictionnaire/index.php?q=serovar
5 génosérogroupes = groupe PCR déterminés par
amplification en chaîne par polymérase. (PCR)
L’espèce L. monocytogenes est divisée en 13
sérovars fondés sur les antigènes somatiques et flagellaires.
Depuis 2005, ces sérovars ont été remplacés par cinq
génosérogroupes déterminés par PCR: IIa (sérovars 1/2a et 3a),
IIb (sérovars 1/2b et 3b), IIc (sérovars 1/2c et 3c), IVb (sérovars
4b, 4d et 4e) et L (autres sérovars). Parmi ceux-ci, les
génosérogroupes IVb, IIa et de IIb (par ordre d’importance) sont
les plus reliés aux cas humains (EURL-L. monocytogenes, 2019). Ces
dernières années, il a été démontré que le sous-typage fondé
sur la séquence du génome complet (WGS) permet une discrimination
supplémentaire substantielle et, par conséquent, peut être utile
aux enquêtes sur les flambées épidémiques. Au sein de l’UE, la
listériose constitue l’une des maladies prioritaires pour
lesquelles une surveillance supranationale renforcée par une
connaissance de la séquence du génome complet a été instaurée en
2018 (Van Walle et al., 2018).
https://food.ec.europa.eu/document/download/78e1d571-12d5-470d-a07a-347f250ee3b8_fr?filename=biosafety_fh_guidance_listeria-monoc_profel_fr.pdf
PCR réaction de polymérisation en chaîne
PFGE typage moléculaire par électrophorèse en
champs pulsé
Séquençage ARNr16S
Gram +
isolé ou en chaînettes, non sporulé
mobile à 20-25 °C / flagelle péritriche
petit bacille : 0,5 à 2 µm x 0,5 µm
Metabolisme
psychrophile [psychro : froid ←
ψυχρός][philo, phile : ami ← φίλος]
halophile [halo : sel ← ἄλος]
saprophyte [sapro : pourri, moisi ←
σαπρός][phyto, phyte : qui pousse ← φυτόν]
Aéro-anaérobie facultatif : la présence
d'oxygène en petite quantité est préférable pour le développement
de la bactérie mais elle peut s'en passer
fermente de nombreux glucides sans production de
gaz : Glucose → ac.lactiq, acétiq, butyriq, isovalériq
catalase positive (en bactériologie systématique
pour l'identification des bactéries. Il s'agit de mettre en contact
une colonie de la bactérie à étudier en présence d'eau oxygénée
(à 10 volumes). Une effervescence (dû à un dégagement de
dioxygène) signe la présence d'une catalase.)
hydrolyse l’esculine
Oxydase négative
D-xylose négative
produit lécithinases
L-rhamnose positive
β-hémolytique (L. monocytogenes croît
facilement en 24 h sur milieux ordinaires ou gélose au sang ou sur
milieux sélectifs (acide nalidixique 40 µg/ml, colimycine 4 µg/ml,
ou trypaflavine 45 µg/ml). Il est immobile à 37°C, et mobile
(péritriche) à 22°C. Les colonies sont petites (1 mm), S smooth, à
bords réguliers, transparentes, irisées bleu vert, entourées d'une
zone d'hémolyse ß sur gélose au sang.)
API : Analytical Profile Index : This is a method
used to identify bacteria based on biochemical reactions between the
bacteria and various chemicals placed in the API wells. This produces
a pattern of colour changes on the API strip which is a signature for
a particular species of bacterium,in this case Listeria
monocytogenes.
Pathologie
listériose, listerellose, maladie du silo
Durée moy. d’incubation : 18 j.
Symptômes : Fièvre, Myalgie, Dorsalgie,
Céphalée, Ataxie … troubles ψ ...coma
2 formes :
- invasives (Tableau) → septicémie,
ménigites, abcès, avortement, infection neonatale
- non-invasives rares → gastroentérites
fébriles
Population sensible = personnes à risque →
Taux de mortalité : 20-30 %
femmes enceintes
Personnes âgées > 80 ans
Cancer, hémopathie, dialyse, diabète 1 DID,
hépatopathie (cirrhose), maladie auto-immune, SIDA, transplantation
d’organe, chimiothérapie, corticothérapie, trait.
immunosuppresseur,
relation dose-effet inconnue
relation dose-réponse dépend de l’état
immunitaire de l’hôte, voire de la virulence de la souche =>
seul l’état immunitaire de l’hôte est pris en compte dans les
relations dose-réponse publiées.
pénétration-invasion : " Les bactéries
adhèrent aux cellules par l'internaline, une protéine de surface 80
kDa, qui interagit avec la E-cadhérine, récepteurs exprimés sur
certaines cellules (intestinales…).. ceci induit la phagocytose des
bactéries. Une 2ème protéine de surface apparentée à
l'internaline, InlB, agit pour favoriser l'entrée dans certaines
cellules telles que les hépatocytes. Les bactéries sont dans les
phagosomes et gagnent le cytoplasme grâce à la listériolysine O
(exotoxine hémolytique) et d'une phospholipase C. Dans le
cytoplasme, les bactéries se multiplient et polymérisent l'actine F
en actine G, créant des "comètes" d'actine qui propulsent
les bactéries hors des cellules. Ceci est due à la protéine ActA
et permet la dissémination des bactéries de cellules à cellules.
Dans les cellules adjacentes, les bactéries sont entourées d'une
double membrane qu'elle détruise par l'action de la listériolysine
O et d'une autre phospholipase."
http://www.microbes-edu.org/etudiant/listeriam.html
" L’épithélium de la villosité
intestinale est constitué d’entérocytes, de cellules caliciformes
sécrétrices de mucus et de cellules M. Les cellules caliciformes
expriment de la E-cadhérine accessible à la lumière intestinale.
La villosité placentaire est recouverte d’un épithélium appelé
syncytiotrophoblaste, résultat de la fusion des cellules du
cytotrophoblaste sous-jacentes. Le syncytiotrophoblaste exprime de la
E-cadhérine accessible au sang maternel dans lequel se trouvent les
bactéries. Listeria monocytogenes traverse les cellules caliciformes
sécrétrices de mucus de l’intestin ainsi que le
syncytiotrophoblaste du placenta. La PI3-kinase est constitutivement
activée dans les cellules caliciformes intestinales, InlA seule est
donc suffisante à l’invasion bactérienne. La PI3-kinase est
faiblement activée dans le syncytiotrophoblaste, ce qui explique
l’action conjointe d’InlA et d’InlB pour l’invasion
cellulaire de Lm. Inl : internaline ; PI3-K : phospho-inositide
3-kinase ; Lm : Listeria monocytogenes."
https://www.medecinesciences.org/en/articles/medsci/full_html/2016/07/medsci20163206p557/F1.html
" Les gènes de virulence de L. monocytogenes
sont répartis en un îlot chromosomique de pathogénicité autour du
gène hly (codant pour la listériolysine O), avec en amont, l'opéron
lécithinase rassemblant les gènes mlp (codant une métalloprotéase
zinc-dépendante nécessaire à la maturation de la
phosphatidyl-choline phospholipase C) et les gènes actA et plcB , et
en aval l'opéron prfA, comprenant le gène prfA . Les gènes inlA et
inlB se trouvent à une certaine distance sur le chromosome.
L'ensemble des gènes de virulence est contrôlé par l'activateur
transcriptionnel PrfA."
http://www.microbes-edu.org/etudiant/listeriam.html
Transmission
ubiquiste (présent partout à la fois) ,
tellurique (de la terre, infection ayant pour
origine des microbes qui se trouvent dans le sol), très largement
répandue dans l’environnement, et résistante dans le milieu
extérieur (sol, lacs, rivières, eaux d’égouts ou de baies, la
végétation principalement en décomposition, etc.)
Psychrotrophe (capable de survivre à basses
températures) => résiste au froid
+ capacité à persister dans les ateliers et les
équipements agro-alimentaires.
+ peut échapper à la pasteurisation
zoonose : dont le pathogène peut être transmis
de l'animal aux humains et inversement
6 à 30 % des bovins, ovins, porcins, caprins et
poulets hébergent naturellement cette bactérie dans leur tube
digestif.
transmission par voie alimentaire 99 % des cas, à
tous les stades de la chaîne alimentaire
transmission directe possible mais rare :
fœtus in utero par passage transplacentaire
des bactéries ou durant l’accouchement
vétérinaires et fermiers après mise bas
d’un animal infecté ou lors d’avortements liés à une
listériose animale.
transmission nosocomiale rare
" direct or indirect evidence that plants can
serve as habitats for Listeria monocytogenes, the causative agent of
the food-borne life-threatening disease listeriosis. The mechanisms
involved in the complex interplay between plants and this bacterium
are addressed, and whether this pathogen elicits an immune response
in plants is discussed. The combination of plant intrinsic factors,
extrinsic biotic factors, and abiotic environmental factors draws the
boundaries of plant habitat colonization by L. monocytogenes."
https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/mbo3.1255
Épidémiologie
taux de létalité élevé (de 25 à 30 %)
taux d’hospitalisation très élevé (> 92 %)
300 cas /an en France
sporadiques [σποραδικός « sporadikos »
disséminé, dispersé par opposition à épidémique et endémique]
Incidence française (Nombre de cas apparus
pendant une année au sein d'une population.) : 4,9 cas de
listériose/million d’habitants ; 5,2 cas pour 100 000 naissances
In the United States, an estimated 2,500 persons
become seriously ill with listeriosis each year. Of these, 500 die.
Prévalence (Nombre de cas de maladies enregistrés
pour une population déterminée et englobant aussi bien les nouveaux
cas que les anciens cas.) : 70 épidémies dans le monde dont 7 en
France
Traitements
Sensible à tous les désinfectants (qlq souches
résistantes à des ammoniums quaternaires) autorisés en IAA –
Industries Alimentaires et Agricoles
Température 30’ à 60°C, 0,2 à 2’ à 70°C,
D65 °C : 0,2 à 2 min, Z : 7,5 °C (4 à 11 °C)
Ionisation D10 = 0,56 kGy (0,25 – 0,77) Le gray
(Gy) représente l'énergie d'un rayonnement ionisant
Lyophilisation à vérifier
Pressions 400 à 600 MPa 5 à 10 min à 20 °C ➞
3 à 8 réductions décimales log10
pH > 10, à pH équivalent, l’acide acétique
est plus inhibiteur que l’acide lactique qui est plus inhibiteur
que l’acide citrique
Surveillance
LNR étudie les souches des plans de surveillance
et de contrôle de la DGAL et de la DGCCRF
CNR reçoit et étudie les souches des
alerteschaque semaine
DGAL Direction Générale de la Santé
CNR Centre National de Référence
LNR Laboratoire national de référence
DGCCRF Direction Générale de la Concurrence, de
la Consommation et de la Répression des Fraudes
règlement (CE) n°183/2005
critères de sécurité du règlement (CE)
n°2073/2005 modifié « absence dans 25 g » ou « inférieur ou
égal à 100 ufc/g » cfu/g colony forming unit (unité de mesure
pour dénombrer les Listeria dans les aliments)
méthode normalisée de référence pour la
recherche (NF EN ISO 11290-1) et pour le dénombrement (NF EN ISO
11290-2)
Recommandations
Producteurs
qualité sanitaire des ensilages :
maîtrise de l’acidification
contaminations tellurique
contaminations fécales
Isoler les animaux malades
hygiène de la traite
refroidissement rapide du lait
Opérateurs
bonnes pratiques d’hygiène
bonne maîtrise de l’environnement de
production
nettoyabilité complète+ séchage des locaux
et des équipements
plan de surveillance de la contamination
chaîne du froid
DLC date limite de consommation
tests de vieillissement NF V01-003
tests de croissance NF V01-009
Microbiologie prévisionnelle ↔ historique
des résultats de l’entreprise ↔ procédé de transformation
Consommateurs
Réfrigérateur tenu < +4°C
A! produits crus
Nettoyer aliments souillés
Pas d’aliments non emballés sur étagères
Nettoyer ustensiles et surfaces de travail
Laver les mains
Laver les légumes et herbes aromatiques
Conserver les restes < 3 jours
Réchauffer à T interne >+70 °C
A! DLC date limite de consommation
consommer le plus rapidement possible les
produits à la coupe
A! les fromages au lait cru surtout à pâte
molle, le fromage vendu râpé, la croûte des fromages, les
poissons fumés, les coquillages crus, le tarama, les graines
germées crues et les produits de charcuterie cuite /pers.à risque
Thérapeutique
L. monocytogenes est sensible à la plupart des
antibiotiques actifs sur les bactéries à Gram+ telles pénicillines
(AMX, amoxicilline), aminoglycosides (K, kanamycine; GM, gentamicine)
à l'exception notable des céphalosporines de 2 ème et 3ème
génération (FOX, céfoxitine; CXM, céfuroxime; CAZ, ceftazidime;
CTX, céfotaxime; MOX, latamoxef), le triméthoprime-sulfaméthoxazole
et la rifampicine.
Le traitement de choix d'une listériose
neuroméningée est l'association ampicilline-aminoside. Chez
l'adulte, l'ampicilline est administrée par voie veineuse à la dose
de 200 mg/kg/jour. Chez le nouveau-né et l'enfant, la dose
d'ampicilline est portée à 400 mg/kg/jour pendant les premiers
jours de l'infection.
References
P.Piveteau : risques microbiologiques
alimentiares. Lavoisier Paris 2017. p.481
Eric Dromigny : les critères
microbiologiques des denrées alimentaires". Lavoisier, Paris
2021.
https://www.ouest-france.fr/economie/consommation/alerte-a-la-listeria-des-produits-de-la-marque-vegan-jay-joy-retires-de-la-vente-8a986866-98c7-11ed-838e-db5cb73079c3
https://www.tf1info.fr/conso/listeria-e-coli-salmonelle-faut-il-s-inquieter-face-aux-rappels-conso-de-produits-en-serie-2248141.html
https://www.foodwatch.org/fr/actualites/2018/listeria-nouveau-scandale-alimentaire-en-europe
https://www.pasteur.fr/fr/file/3252/download?token=nuSFUB9S#page=1&zoom=auto,-158,842
https://www.anses.fr/fr/system/files/BIORISK2016SA0081Fi.pdf
https://sante.gouv.fr/soins-et-maladies/maladies/maladies-infectieuses/article/listeriose
http://www.microbes-edu.org/etudiant/listeriam.html
https://www.pasteur.fr/sites/default/files/rubrique_pro_sante_publique/les_cnr/listeria/cnr-listeria-rapport-2012-site-web.pdf
https://www.sciencesetavenir.fr/sante/qu-est-ce-que-la-listeria-la-bacterie-de-la-listeriose_163421
https://www.sciencephoto.fr/images/listeria
https://fr.wikipedia.org/wiki/Listeria_monocytogenes
https://hal.science/hal-01204374/document
https://www.canada.ca/fr/sante-publique/services/biosecurite-biosurete-laboratoire/fiches-techniques-sante-securite-agents-pathogenes-evaluation-risques/listeria-monocytogenes.html
http://unt-ori2.crihan.fr/unspf/2009_Angers_Cottin_ListeriaMonocytogenes/co/zModule_cas05.html
https://www.medecinesciences.org/en/articles/medsci/full_html/2010/06/medsci2010265p545/F1.html
https://www.academie-medecine.fr/croissance-microbienne-et-froid-etude-du-cas-particulier-de-listeria-monocytogenes/
https://www.sfm-microbiologie.org/wp-content/uploads/2019/07/BACTERIE_Listeria.pdf
https://www.vigilab.com/documentation/fiches-microbiologie/listeria-sp-et-l-monocytogenes
https://food.ec.europa.eu/system/files/2022-04/biosafety_fh_guidance_listeria-monoc_profel_fr.pdf
https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S1773035X14725730
https://www.mdpi.com/2304-8158/10/6/1381#
https://fr.wikipedia.org/wiki/Réaction_en_chaîne_par_polymérase
https://www.creative-diagnostics.com/listeria-monocytogenes-based-vaccines.htm
Alice Lebreton, Hélène Bierne, Pascale Cossart.
Les multiples stratégies de Listeria. Pour la science, 2012, 412,
pp.42-49. hal-01204374
https://cdn.lecturio.com/assets/L.-Monocytogenes-cycle-of-infection.png
https://www.researchgate.net/figure/Common-routs-of-entry-for-Listeria-in-food-processing-facilities_fig3_359084731
https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/mbo3.1255
https://www.researchgate.net/figure/Nombre-de-cas-de-listeriose-declares-par-an-en-France-entre-1999-et-2013_fig2_263483910
Maintenant,
c’est à vous !
1/ choisissez une affaire, un article de presse
2/ analyser et disséquez l’article
3/ recherchez les infos manquantes
4/ préparez votre présentation
5/ partagez/réservez votre intervention sur
tableau en ligne : : https://lite.framacalc.org/328t4o5nye-a307